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蘭伯艾克斯|二氧化碳培養箱:細胞培養小科普

更新時間:2023-07-17點擊次數:1021


二氧化碳培養箱:細胞培養小科普


圖片


大家有沒有試過,把培養基凍起來,顏色會有變化嗎?顏色一開始變黃!解凍以后,又會慢慢變紅!為什么呢?


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如果凍的液體是水,或是緩沖液,顏色會有變化嗎?

并不會有變化!


原因是因為,培養基中會加入酸堿指示劑,例如酚紅,用于檢測培養基的酸堿性。當培養基酸性增加時,酚紅會呈現黃色,當培養基堿性增加時,酚紅會呈現紅色。


在細胞培養過程中,細胞代謝會產生酸性代謝產物,使培養基酸性增加,因此培養基會逐漸變黃。當培養基解凍后,酸性代謝產物逐漸消耗,培養基的酸性減少,導致酚紅顏色逐漸變回紅色。


如果凍結的液體是水或緩沖液,一般不會出現顏色的變化。這是因為水和緩沖液不含有酸堿指示劑,所以當其凍結和解凍時,顏色不會發生變化。


2

為什么細胞培養基冷凍以后,會變酸呢?


細胞培養基凍結后變酸的原因是由于冰凍過程中,液體中的二氧化碳和其他氣體會逸出。冰結過程中,水分子會有序排列形成晶體,氣體無法溶解在冰中,因此逸出。培養基中二氧化碳的減少會導致酸堿度的變化,使培養基變酸,從而導致培養基的顏色變黃。


3


培養箱的CO2濃度為什么要設置5%?


培養箱的CO2濃度設置為5%是為了模擬細胞/組織在生物體內的生長環境,并提供適合細胞體外培養的條件。培養箱要求穩定的溫度、CO2水平、酸堿度和濕度,其中CO2濃度的穩定性對細胞培養非常重要。


以常用的細胞培養基DMEM為例,其碳酸氫鈉濃度為1.5g/L。廠家已經測試好對應的培養箱濃度在5%左右,假如該培養基碳酸氫鈉濃度變為3g/L,則培養箱CO2濃度應維持在10%。


國外常用的培養條件就是,1升培養基里含3克NaCO3,CO2培養箱的濃度是10%。而國內大多數是5%的濃度,相對應的培養基內碳酸氫鈉濃度就在1.5g/L左右。



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